Difference between revisions of "Team:HUST-China/Notebook"

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                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT1</td>
+
                                             <td>3 x LBT1</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT2</td>
+
                                             <td>3 x LBT2</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT3</td>
+
                                             <td>3 x LBT3</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT4</td>
+
                                             <td>3 x LBT4</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT9</td>
+
                                             <td>3 x LBT9</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT10</td>
+
                                             <td>3 x LBT10</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT11</td>
+
                                             <td>3 x LBT11</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT12</td>
+
                                             <td>3 x LBT12</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>                                                     
 
                                         </tr>                                                     
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                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT5_1</td>
+
                                             <td>3 x LBT5_1</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT5_2</td>
+
                                             <td>3 x LBT5_2</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT6_1</td>
+
                                             <td>3 x LBT6_1</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT6_2</td>
+
                                             <td>3 x LBT6_2</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT7_1</td>
+
                                             <td>3 x LBT7_1</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT7_2</td>
+
                                             <td>3 x LBT7_2</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT8_1</td>
+
                                             <td>3 x LBT8_1</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT8_2</td>
+
                                             <td>3 x LBT8_2</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                             <td>50μl</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
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                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT2</td>
+
                                             <td>3 x LBT2</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT3</td>
+
                                             <td>3 x LBT3</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT4</td>
+
                                             <td>3 x LBT4</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT8</td>
+
                                             <td>3 x LBT8</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
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                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT2</td>
+
                                             <td>3 x LBT2</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT3</td>
+
                                             <td>3 x LBT3</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT4</td>
+
                                             <td>3 x LBT4</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT8</td>
+
                                             <td>3 x LBT8</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
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                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT1</td>
+
                                             <td>3 x LBT1</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT5</td>
+
                                             <td>3 x LBT5</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT6</td>
+
                                             <td>3 x LBT6</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT7</td>
+
                                             <td>3 x LBT7</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT9</td>
+
                                             <td>3 x LBT9</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                          
 
                                          
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT10</td>
+
                                             <td>3 x LBT10</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT11</td>
+
                                             <td>3 x LBT11</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
  
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT12</td>
+
                                             <td>3 x LBT12</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                             <td>HindIII and BamHI</td>
 
                                         </tr>                                       
 
                                         </tr>                                       
Line 865: Line 865:
 
                                   <tbody>
 
                                   <tbody>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT2</td>
+
                                             <td>3 x LBT2</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 871: Line 871:
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT3</td>
+
                                             <td>3 x LBT3</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 877: Line 877:
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT4</td>
+
                                             <td>3 x LBT4</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 883: Line 883:
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT8</td>
+
                                             <td>3 x LBT8</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 958: Line 958:
 
                                   <tbody>
 
                                   <tbody>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT1</td>
+
                                             <td>3 x LBT1</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 964: Line 964:
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT5</td>
+
                                             <td>3 x LBT5</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 970: Line 970:
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT6</td>
+
                                             <td>3 x LBT6</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 976: Line 976:
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT7</td>
+
                                             <td>3 x LBT7</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 983: Line 983:
  
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT9</td>
+
                                             <td>3 x LBT9</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 989: Line 989:
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT10</td>
+
                                             <td>3 x LBT10</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 995: Line 995:
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT11</td>
+
                                             <td>3 x LBT11</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 1,001: Line 1,001:
 
                                         </tr>
 
                                         </tr>
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
−
                                             <td>3*LBT12</td>
+
                                             <td>3 x LBT12</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut)</td>
 
                                             <td>Top10</td>
 
                                             <td>Top10</td>
Line 1,936: Line 1,936:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 1</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 1</td>
−
                                             <td>Pst I and Spe I</td>
+
                                             <td>EcoRI and Spe I</td>
 
                                         </tr>  
 
                                         </tr>  
  
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 4</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 4</td>
−
                                             <td>Pst I and Spe I</td>
+
                                             <td>EcoRI and Spe I</td>
 
                                         </tr>  
 
                                         </tr>  
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 10</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 10</td>
−
                                             <td>Pst I and Spe I</td>
+
                                             <td>EcoRI and Spe I</td>
 
                                         </tr>  
 
                                         </tr>  
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 11</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 11</td>
−
                                             <td>Pst I and Spe I</td>
+
                                             <td>EcoRI and Spe I</td>
 
                                         </tr>  
 
                                         </tr>  
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>pSB1C3</td>
 
                                             <td>pSB1C3</td>
−
                                             <td>Pst I and Spe I</td>
+
                                             <td>EcoRI and Spe I</td>
 
                                         </tr>                                               
 
                                         </tr>                                               
 
                                   </tbody>
 
                                   </tbody>
Line 1,977: Line 1,977:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 3</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 3</td>
−
                                             <td>Pst I and Spe I</td>
+
                                             <td>EcoRI and Spe I</td>
 
                                         </tr>  
 
                                         </tr>  
  
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 6</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 6</td>
−
                                             <td>Pst I and Spe I</td>
+
                                             <td>EcoRI and Spe I</td>
 
                                         </tr>  
 
                                         </tr>  
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 7</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 7</td>
−
                                             <td>Pst I and Spe I</td>
+
                                             <td>EcoRI and Spe I</td>
 
                                         </tr>  
 
                                         </tr>  
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 8</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 8</td>
−
                                             <td>Pst I and Spe I</td>
+
                                             <td>EcoRI and Spe I</td>
 
                                         </tr>  
 
                                         </tr>  
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 11</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 11</td>
−
                                             <td>Pst I and Spe I</td>
+
                                             <td>EcoRI and Spe I</td>
 
                                         </tr>  
 
                                         </tr>  
  
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 12</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 12</td>
−
                                             <td>Pst I and Spe I</td>
+
                                             <td>EcoRI and Spe I</td>
 
                                         </tr>  
 
                                         </tr>  
 
                                                                        
 
                                                                        
Line 2,025: Line 2,025:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 1</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 1</td>
−
                                             <td>pSB1C3(Pst I and Spe I cut)</td>
+
                                             <td>pSB1C3(EcoRI and Spe I cut)</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
Line 2,032: Line 2,032:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 3</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 3</td>
−
                                             <td>pSB1C3(Pst I and Spe I cut)</td>
+
                                             <td>pSB1C3(EcoRI and Spe I cut)</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
Line 2,039: Line 2,039:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 4</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 4</td>
−
                                             <td>pSB1C3(Pst I and Spe I cut)</td>
+
                                             <td>pSB1C3(EcoRI and Spe I cut)</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
Line 2,046: Line 2,046:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 8</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 8</td>
−
                                             <td>pSB1C3(Pst I and Spe I cut)</td>
+
                                             <td>pSB1C3(EcoRI and Spe I cut)</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
Line 2,052: Line 2,052:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-Sitag</td>
 
                                             <td>OprF-Sitag</td>
−
                                             <td>pSB1C3(Pst I and Spe I cut)</td>
+
                                             <td>pSB1C3(EcoRI and Spe I cut)</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
Line 2,078: Line 2,078:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 6</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 6</td>
−
                                             <td>pSB1C3(Pst I and Spe I cut)</td>
+
                                             <td>pSB1C3(EcoRI and Spe I cut)</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
Line 2,085: Line 2,085:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 7</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 7</td>
−
                                             <td>pSB1C3(Pst I and Spe I cut)</td>
+
                                             <td>pSB1C3(EcoRI and Spe I cut)</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
Line 2,092: Line 2,092:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 10</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 10</td>
−
                                             <td>pSB1C3(Pst I and Spe I cut)</td>
+
                                             <td>pSB1C3(EcoRI and Spe I cut)</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
Line 2,099: Line 2,099:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 11</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 11</td>
−
                                             <td>pSB1C3(Pst I and Spe I cut)</td>
+
                                             <td>pSB1C3(EcoRI and Spe I cut)</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
Line 2,105: Line 2,105:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 12</td>
 
                                             <td>OprF-3 X LBT 12</td>
−
                                             <td>pSB1C3(Pst I and Spe I cut)</td>
+
                                             <td>pSB1C3(EcoRI and Spe I cut)</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
Line 2,255: Line 2,255:
 
                                         <tr>
 
                                         <tr>
 
                                             <td>pmrC-GFP</td>
 
                                             <td>pmrC-GFP</td>
−
                                             <td>pSB1C3(Pst I and Spe I cut)</td>
+
                                             <td>pSB1C3(PstI and XbaI cut)</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>DH5a</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>
 
                                             <td>LB(chl added)</td>

Revision as of 10:38, 30 October 2017

Notebook

「Notebook」

Sensing part

OprF→OprF-pET28a

7.2

PCR

Efan Wang

Name Total
OprF 1 50 μl
OprF 2 50 μl
OprF 3 50 μl
OprF 4 50 μl
demo1

7.17

Restriction Enzyme Digestion

Ziyang Xiao & Zichun Weng & Yuqi Wu

Name Enzyme
pET28a NheI and BamHI
OprF 1 NheI and BamHI
OprF 2 NheI and BamHI

7.27

DNA ligation & transformation

Ziyang Xiao

Name Backbone Strain Medium
OprF pET28a(BamH I and Nhe I cut) Top10 LB(kan added)

7.28

Colony PCR

Xiao Deng

Number Name
1 OprF-pET28a
2 OprF-pET28a
3 OprF-pET28a
4 OprF-pET28a
5 OprF-pET28a
demo1

3×LBT1-12 & Si-tag→OprF-3×LBT X(or Si-tag)-pET28a

7.22

PCR

Ziyang Xiao & Zichun Weng

Name Total
3 x LBT1 50μl
3 x LBT2 50μl
3 x LBT3 50μl
3 x LBT4 50μl
3 x LBT9 50μl
3 x LBT10 50μl
3 x LBT11 50μl
3 x LBT12 50μl

7.27

PCR

Efan Wang & Ziyang Xiao

Name Total
3 x LBT5_1 50μl
3 x LBT5_2 50μl
3 x LBT6_1 50μl
3 x LBT6_2 50μl
3 x LBT7_1 50μl
3 x LBT7_2 50μl
3 x LBT8_1 50μl
3 x LBT8_2 50μl
Sitag 1 50μl
Sitag2 50μl
demo1

7.27

Restriction Enzyme Digestion

Ziyang Xiao & Ting Peng

Name Enzyme
OprF-pET28a HindIII and BamHI
3 x LBT2 HindIII and BamHI
3 x LBT3 HindIII and BamHI
3 x LBT4 HindIII and BamHI
3 x LBT8 HindIII and BamHI
Sitag HindIII and BamHI

7.27

Restriction Enzyme Digestion

Ziyang Xiao & Ting Peng

Name Enzyme
OprF-pET28a HindIII and BamHI
3 x LBT2 HindIII and BamHI
3 x LBT3 HindIII and BamHI
3 x LBT4 HindIII and BamHI
3 x LBT8 HindIII and BamHI
Sitag HindIII and BamHI

8.4

Restriction Enzyme Digestion

Xiao Deng

Name Enzyme
3 x LBT1 HindIII and BamHI
3 x LBT5 HindIII and BamHI
3 x LBT6 HindIII and BamHI
3 x LBT7 HindIII and BamHI
3 x LBT9 HindIII and BamHI
3 x LBT10 HindIII and BamHI
3 x LBT11 HindIII and BamHI
3 x LBT12 HindIII and BamHI

7.28

DNA ligation & transformation

Xiao Deng & Ting Peng

Name Backbone Stain Medium
3 x LBT2 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)
3 x LBT3 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)
3 x LBT4 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)
3 x LBT8 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)
Sitag OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)

7.29

Colony PCR

Xiao Deng

Number Name
1 OprF-3×LBT2-pET28a
2 OprF-3×LBT3-pET28a
3 OprF-3×LBT4-pET28a
4 OprF-3×LBT8-pET28a
5 OprF-Sitag-pET28a
demo1

8.12

DNA ligation & transformation

Xiao Deng & Nan Hu & Shaofeng Liao

Name Backbone Stain Medium
3 x LBT1 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)
3 x LBT5 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)
3 x LBT6 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)
3 x LBT7 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)
3 x LBT9 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)
3 x LBT10 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)
3 x LBT11 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)
3 x LBT12 OprF-pET28a(BamHI and HindIII cut) Top10 LB(kan added)

8.13

Colony PCR

Xiao Deng

Number Name
1 OprF-3×LBT2-pET28a
2 OprF-3×LBT3-pET28a
3 OprF-3×LBT4-pET28a
4 OprF-3×LBT8-pET28a
5 OprF-Sitag-pET28a
6 OprF-3×LBT4-pET28a
7 OprF-3×LBT8-pET28a
8 OprF-Sitag-pET28a
demo1

Recycling part

pmrC-GFP→pmrC-GFP-pBAD30

7.10

PCR

Yiyan Yu

Name Total
pmrC-GFP 50μl
demo1

7.19

Restriction Enzyme Digestion

Yiyan Yu

Name Enzyme
pmrC-GFP EcoRI and Hind III
pBAD30 EcoRI and Hind III

7.20

DNA ligation & transformation

Yiyan Yu & Qingyang Yu

Name Backbone Strain Medium
pmrC-GFP pBAD30(EcoR I and Hind III cut) Top10 LB(amp added)

7.21

Colony PCR

Yiyan Yu

Number Name
1 pmrC-GFP-pBAD30
5 pmrC-GFP-pBAD30
6 pmrC-GFP-pBAD30

pmrA-pmrB-Fe→pmrA-pmrB-Fe-pBAD30

7.8

PCR

Long Cheng

Name Total
pmrA-pmrB-Fe 50 μl
demo1

7.19

Restriction Enzyme Digestion

Yiyan Yu

Name Enzyme
pmrA-pmrB-Fe EcoRI and KpnI
pBAD30 EcoRI and KpnI

7.20

Restriction Enzyme Digestion

Yiyan Yu & Qingyang Yu

Name Backbone Strain Medium
pmrA-pmrB-Fe pBAD30(EcoR I and Hind III cut) Top10 LB(amp added)

7.21

Colony PCR

Yiyan Yu

Number Name
1 pmrA-pmrB-Fe-pBAD30
5 pmrA-pmrB-Fe-pBAD30
6 pmrA-pmrB-Fe-pBAD30
demo1

pmrA-pmrB-Fe-pBAD30→pmrA-pmrB-LBT X-pBAD30

7.25

PCR

Yiyan Yu

Name Total
LBT 1 to 12 50 μl each
demo1

8.10

Point mutation

Xiaoyang Li

Name Total
pmrA-pmrB-Fe-pBAD30 50 μl

8.20

Restriction Enzyme Digestion

Xiaoyang Li

Name Enzyme
pmrA-pmrB-Fe-pBAD30 AhdI and SacI
LBT 1 AhdI and SacI
LBT 11 AhdI and SacI
demo1

8.20

Transformation

Xiaoyang Li & Yating Hu

Name Backbone Strain Medium
LBT 1 pmrA-pmrB-Fe-pBAD30(AhdI and SacI cut) Top10 LB(amp added)
LBT 11 pmrA-pmrB-Fe-pBAD30(AhdI and SacI cut) Top10 LB(amp added)

8.21

Colony PCR

Xiaoyang Li

Number Name
1 pmrA-pmrB-LBT 1-pBAD30
1 pmrA-pmrB-LBT 11-pBAD30
demo1

8.10

Bypass PCR

Yating Hu

Name Total
pmrA-pmrB-Fe&LBT 2 50 μl
pmrA-pmrB-Fe&LBT 3 50 μl
pmrA-pmrB-Fe&LBT 4 50 μl
pmrA-pmrB-Fe&LBT 5 50 μl
pmrA-pmrB-Fe&LBT 6 50 μl
pmrA-pmrB-Fe&LBT 7 50 μl
pmrA-pmrB-Fe&LBT 8 50 μl
pmrA-pmrB-Fe&LBT 9 50 μl
pmrA-pmrB-Fe&LBT 10 50 μl
pmrA-pmrB-Fe&LBT 12 50 μl

9.2

Restriction Enzyme Digestion

Xiaoyang Li

Name Enzyme
pmrA-pmrB-LBT2 EcoRI and KpnI
pmrA-pmrB-LBT3 EcoRI and KpnI
pmrA-pmrB-LBT4 EcoRI and KpnI
pmrA-pmrB-LBT5 EcoRI and KpnI
pmrA-pmrB-LBT6 EcoRI and KpnI
pmrA-pmrB-LBT7 EcoRI and KpnI
pmrA-pmrB-LBT8 EcoRI and KpnI
pmrA-pmrB-LBT9 EcoRI and KpnI
pmrA-pmrB-LBT10 EcoRI and KpnI
pmrA-pmrB-LBT12 EcoRI and KpnI
demo1

8.20

Transformation

Xiaoyang Li & Yating Hu

Name Backbone Strain Medium
pmrA-pmrB-LBT 2,3,4,5,6,7,8,9,10,12 pBAD30(EcoR I and Kpn I cut) Top10 LB(amp added)

9.3

Colony PCR

Xiaoyang Li

Number Name
1 pmrA-pmrB-LBT 2
2 pmrA-pmrB-LBT 3
3 pmrA-pmrB-LBT 4
4 pmrA-pmrB-LBT 5
5 pmrA-pmrB-LBT 6
6 pmrA-pmrB-LBT 7
7 pmrA-pmrB-LBT 8
8 pmrA-pmrB-LBT 9
9 pmrA-pmrB-LBT 10
10 pmrA-pmrB-LBT 12
demo1

pmrA-pmrB-LBT X-pBAD30→pmrA-pmrB-LBT X-pmrC-GFP-pBAD30

10.18

PCR

Long Cheng

Name Total
pmrA-pmrB-LBT 5 30 μl
pmrA-pmrB-LBT 9 30 μl
pmrA-pmrB-LBT 11 30 μl
pmrC-GFP 50 μl

10.19

Bypass PCR

Xiaoyang Li & Qingyang Yu

Name Total
pmrA-pmrB-LBT 5 & pmrC-GFP 50 μl
pmrA-pmrB-LBT 9 & pmrC-GFP 50 μl
pmrA-pmrB-LBT 11 & pmrC-GFP 50 μl
demo1

10.19

Restriction Enzyme Digestion

Xiaoyang Li

Name Enzyme
pmrA-pmrB-LBT 5 & pmrC-GFP EcoRI and Hind III
pmrA-pmrB-LBT 9 & pmrC-GFP EcoRI and Hind III
pmrA-pmrB-LBT 11 & pmrC-GFP EcoRI and Hind III
pBAD30 EcoRI and Hind III

10.19

DNA ligation & transformation

Xiaoyang Li & Yating Hu

Name Backbone Strain Medium
pmrA-pmrB-LBT 5-pmrC-GFP pBAD30(EcoRI and Hind III cut) Top10 LB(amp added)
pmrA-pmrB-LBT 9-pmrC-GFP pBAD30(EcoRI and Hind III cut) Top10 LB(amp added)
pmrA-pmrB-LBT 11-pmrC-GFP pBAD30(EcoRI and Hind III cut) Top10 LB(amp added)

10.20

Colony PCR

Xiaoyang Li

Number Name
1 pmrA-pmrB-LBT 5-pmrC-GFP
1 pmrA-pmrB-LBT 9-pmrC-GFP
1 pmrA-pmrB-LBT 11-pmrC-GFP

Standardization Part

pmrA-pmrB-LBT X-pBAD30→pmrA-pmrB-LBT X-pmrC-GFP-pBAD30

8.20

PCR

Yubei Sun & Huiping Shi

Name Total
OprF-3 X LBT1 50 μl
OprF-3 X LBT4 50 μl
OprF-3 X LBT8 50 μl
OprF-3 X LBT10 50 μl
OprF-3 X LBT11 50 μl
OprF-3 X LBT12 50 μl
demo1

9.20

Bypass PCR

Efan Wang

Name Total
OprF-3 X LBT3 50 μl
OprF-3 X LBT6 50 μl
OprF-3 X LBT7 50 μl
OprF-Sitag 50 μl
demo1

9.5

Restriction Enzyme Digestion

Yubei Sun & Ziyi Li

Name Enzyme
OprF-3 X LBT 1 EcoRI and Spe I
OprF-3 X LBT 4 EcoRI and Spe I
OprF-3 X LBT 10 EcoRI and Spe I
OprF-3 X LBT 11 EcoRI and Spe I
pSB1C3 EcoRI and Spe I

9.20

Restriction Enzyme Digestion

Huiping Shi

Name Enzyme
OprF-3 X LBT 3 EcoRI and Spe I
OprF-3 X LBT 6 EcoRI and Spe I
OprF-3 X LBT 7 EcoRI and Spe I
OprF-3 X LBT 8 EcoRI and Spe I
OprF-3 X LBT 11 EcoRI and Spe I
OprF-3 X LBT 12 EcoRI and Spe I

9.27

DNA ligation & transformation

Yubei Sun & Huiping Shi

Name Backbone Strain Medium
OprF-3 X LBT 1 pSB1C3(EcoRI and Spe I cut) DH5a LB(chl added)
OprF-3 X LBT 3 pSB1C3(EcoRI and Spe I cut) DH5a LB(chl added)
OprF-3 X LBT 4 pSB1C3(EcoRI and Spe I cut) DH5a LB(chl added)
OprF-3 X LBT 8 pSB1C3(EcoRI and Spe I cut) DH5a LB(chl added)
OprF-Sitag pSB1C3(EcoRI and Spe I cut) DH5a LB(chl added)

9.27

DNA ligation & transformation

Ziyang Xiao

Name Backbone Strain Medium
OprF-3 X LBT 6 pSB1C3(EcoRI and Spe I cut) DH5a LB(chl added)
OprF-3 X LBT 7 pSB1C3(EcoRI and Spe I cut) DH5a LB(chl added)
OprF-3 X LBT 10 pSB1C3(EcoRI and Spe I cut) DH5a LB(chl added)
OprF-3 X LBT 11 pSB1C3(EcoRI and Spe I cut) DH5a LB(chl added)
OprF-3 X LBT 12 pSB1C3(EcoRI and Spe I cut) DH5a LB(chl added)

9.28

Colony PCR

Yubei Sun

Number Name
1 OprF-3×LBT1-pSB1C3
2 OprF-3×LBT3-pSB1C3
3 OprF-3×LBT4-pSB1C3
4 OprF-3×LBT8-pSB1C3
5 OprF-Sitag-pSB1C3

9.30

Colony PCR

Ziyang Xiao

<
Number Name
1 OprF-3×LBT6-pSB1C3
2 OprF-3×LBT7-pSB1C3
3 OprF-3×LBT10-pSB1C3
4 OprF-3×LBT11-pSB1C3
5OprF-3×LBT12-pSB1C3

pmrA-pmrB-LBT X-pBAD30→pmrA-pmrB-LBT X-pmrC-GFP-pBAD30

10.2

PCR

Ziyang Xiao

Name Total
pmrC-GFP 30 μl

9.5

Restriction Enzyme Digestion

Yubei Sun

Name Enzyme
pmrC-GFP Pst I and XbaI

9.27

DNA ligation & transformation

Ziyang Xiao

Name Backbone Strain Medium
pmrC-GFP pSB1C3(PstI and XbaI cut) DH5a LB(chl added)

10.6

Colony PCR

Ziyang Xiao

Number Name
1 pmrC-GFP-pSB1C3
2 pmrC-GFP-pSB1C3
3 pmrC-GFP-pSB1C3
4 pmrC-GFP-pSB1C3
5 pmrC-GFP-pSB1C3

pmrA-pmrB-LBT X-pmrC-GFP-pBAD30→pmrA-pmrB-LBT X-pmrC-GFP-pSB1C3

10.26

PCR

Ziyang Xiao

Name Total
pmrA-pmrB-LBT 5-pmrC-GFP 30 μl
pmrA-pmrB-LBT 9-pmrC-GFP 30 μl
pmrA-pmrB-LBT 11-pmrC-GFP 30 μl

10.4

Restriction Enzyme Digestion

Huiping Shi

Name Enzyme
pmrA-pmrB-LBT 5-pmrC-GFP Pst I and XbaI
pmrA-pmrB-LBT 9-pmrC-GFP Pst I and XbaI
pmrA-pmrB-LBT 11-pmrC-GFP Pst I and XbaI

10.5

DNA ligation & transformation

Huiping Shi

Name Backbone Strain Medium
pmrA-pmrB-LBT 5-pmrC-GFP pSB1C3(Pst I and Spe I cut) DH5a LB(chl added)
pmrA-pmrB-LBT 9-pmrC-GFP pSB1C3(Pst I and Spe I cut) DH5a LB(chl added)
pmrA-pmrB-LBT 11-pmrC-GFP pSB1C3(Pst I and Spe I cut) DH5a LB(chl added)

10.6

Colony PCR

Ziyang Xiao

Number Name
1 pmrA-pmrB-LBT 5-pmrC-GFP
2 pmrA-pmrB-LBT 9-pmrC-GFP
3 pmrA-pmrB-LBT 11-pmrC-GFP

Acknowledgments: